TERAPIA GÉNICA: ALZHEIMER

Título del articulo: CRTC1 activa un programa transcripcional desregulado en las etapas relacionadas con la enfermedad de Alzheimer precoz

Tipo de terapia génica: ex vivo somática

Animal de experimentación: ratones sanos controles y en ratones transgénicos que desarrollan la enfermedad (EA).

Vector:Adenovirus

Células receptoras: Neuronas del hipocampo

Vía: Intraventricular

Bibiografía

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24760838

STEM CELLS: ALZHEIMER

En modelos animales de enfermedad de Parkinson, Alzheimer y de daño de médula espinal se han empleado con frecuencia progenitores neurales derivados de células madre embrionarias en cultivo o procedentes de cerebros fetales o neonatales.Estos experimentos demostraron que las células trasplantadas eran capaces de diferenciarse en neuronas, astrocitos u oligodendrocitos integrándose adecuadamente en los circuitos neurales, pero la supervivencia de las células y la reparación funcional fue insuficiente en muchos casos .

La limitada disponibilidad de donantes, los problemas éticos, y el rechazo inmunológico son graves inconvenientes de estas fuentes celulares para uso clínico. 

Bibliografía:

http://www.medigraphic.com/pdfs/hematologia/re-2011/re113g.pdf

http://ac.els-cdn.com/S1934590912002378/1-s2.0-S1934590912002378-main.pdf?_tid=62ad2fd8-9ebd-11e4-b0f8-00000aab0f27&acdnat=1421549876_af40fbae47eb205df658da63e682d397

TRASGNÉNICOS EN LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER

Recientemente, el avance de la tecnología de transferencia génica mediada por virus ha permitido la expresión de la APP humana (hAPP) 695 que lleva la mutación sueca en el hipocampo de rata adulta. Esto indujo Aß42 inmunorreactividad y déficits de aprendizaje en el MWM hasta 12 meses después de la inyección. Sin embargo, la inyección no dio lugar a la deposición de placas de Aß, gliosis o pérdida neuronal. 

La transferencia de genes mediada por virus de péptidos Aß42 y Aß40 humanos que llevan la mutación británica en el hipocampo de ratas Wistar adultas también ha ayudado a establecer la contribución de cada especie de Aß en el año

Bibliografía:

http://www.molecularneurodegeneration.com/content/8/1/37


TALLER DE CLONACIÓN COMPLETA

¿Qué tipo de animal se clono?
Ratón
¿Cómo fue clonado?
Pasos
1.-Aislar células donantes de Mimi (célula somática)y Megdo (Óvulo ).
2.-Remover y desechar en núcleo del óvulo.
3.-Transferir en núcleo de la células somática en la celúla anucleada.
4.-Estimular la división celular.
5.-Implantar el embrión dentro de Momi, la madre sustituta.
6.-Recibir en bebe clonado de Mimi.
Resultados
Se obtuvo un ratón (bebe)clonado de color café ya que el núcleo donado procedía de una ratón de color café (Mimi).

ADN RECOMBINANTE: ALZHEIMER

Los científicos lograron desarrollar una terapia génica para revertir la pérdida de memoria en estados iniciales del Alzheimer en ratones.

A estos se les inyectó en el hipocampo, un gen que provoca la producción de una proteína que está bloqueada en los pacientes con la enfermedad, la denominada "Crtc1".

En las personas con la enfermedad, la formación de agregados de placas amieloides un conocido proceso que desencadena el Alzheimer, impide que la proteína Crtc1 actúe de manera normal. "Cuando la proteína Crtc1 se altera no se pueden activar los genes responsables de la sinapsis o conexiones entre neuronas del hipocampo y el individuo no puede realizar correctamente tareas de memoria", explicó el doctor Carlos Saura, responsable de la investigación.

La proteína restituida por la terapia génica permite desencadenar las señales necesarias para activar los genes implicados en la consolidación de la memoria a largo plazo.

Biliografía:

http://www.jneurosci.org/content/34/17/5776.full.pdf+html

RECOMBINACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS EN LA NATURALEZA

La transformación es el proceso por el cual ciertas bacterias llamadas competentes son
capaces de incorporar ADN exógeno o extraño, proveniente de otras bacterias, que se encuentra
libre en el medio.

Ejemplos de bacterias con competencia natural son Haemóphilus influenzae, Neisseria sp, Streptococcus pneumoniae y ciertas especies de Bacillus.

Las bacterias también pueden ser transformadas con ADN viral, en cuyo caso el proceso se
llama transfección.

Bibliografía:
http://www.higiene.edu.uy/cefa/Libro2002/Cap%2012.pdf



PRUEBAS DE SECUENCIACIÓN: ALZHEIMER

Los exones 3-12 del gen PSEN1 fueron analizados por secuenciación.

Se halló un cambio de nucleótido (A>G) en el exón 5 del gen PSEN1. Esta alteración genética conduce a un cambio de aminoácido en el codón 120 de glutamato (GAA) a glicina (GGA) que conduce a la mutación E120G.

La mutación E120G, al igual que la mayoría de las mutaciones en este gen descritas, conduce a una EA de inicio precoz con un patrón de herencia autosómico dominante.

Se enfatiza la importancia de realizar los estudios genéticos con técnicas de secuenciación directa en casos compatibles aun en casos negativos por técnicas menos sensibles.

Bibliografía:

http://revistaalzheimer.com/PDF/0215.pdf

http://zl.elsevier.es/es/revista/neurologia-295/nueva-mutacion-gen-psen1-e120g-asociada-enfermedad-13148568-originales-2010

ANÁLISIS DEL ARTÍCULO

TEMA: Interacción apolipoproteína E4 de dominio media los efectos perjudiciales sobre la mitocondria y es un potencial terapéutico diana para la enfermedad de Alzheimer.

OBJETIVO: Determinar si la expresión neuronal de apoE4 y dominio de interacción apoE4 puede ncausar disfunción mitocondrial, se compararon los efectos de la apoE isoforma dependiente de la mitocondria en ambas neuronas y astrocitos.

MUESTRA: Cultivos neuronales de ratón. Extracción PhosphoSafe (Novagen), incubacón en OptiMEM (Invitrogen), HotSybr PCR kit.
ÁCIDO NUCLEICO: ADN
GEN: 5 -GGTCAACCAGGTGCACTTTT, and 5 - TGGGGCTCCGATTATTAGTG (cytochrome c oxidase subunit 1), 5 -TTATCCCCCGAATCTCTGTG and 5 - GCAATCGATGTTTTCCCAGT (ATP synthase subunit ), 5 -CTGAGTATGGGCTGACGTTTAC and 5 -GGTGAGCTTCAGTCCACGAG

(VDAC1), 5 -GGCTGTATTCCCTCCATCG, and 5 -CCAGTTGGTAACAATGCCATGT( -actin).
PCR: PCR-RT

VISUALIZACIÓN:Electroforesis

Bibliografía:
http://www.jbc.org/content/286/7/5215.full.pdf+html